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最近老闆跟別人要了一罐293T要我養 在網上搜尋到相關資訊 培養基 DMEM+10%FBS 繼代的話用 trypsin 將細胞打下來 這個細胞容易飄跟結塊 我看ATCC上寫加trypsin後不可以搖動敲擊 放在培養箱裡培養之後 拿出來要先加medium才能打不然會結塊 網上又有搜尋到不能讓他長滿大概八分滿 除了這些還有什麼需要注意的嗎>< —- 對了我在網上搜尋相關養法的時候看到的簡體字網站比較多欸..這是正常的嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.126.102.23 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1534137836.A.F53.html
tynse71864: PBS不要沖太大力 08/13 15:45
MeiAC: 我都直接用PBS沖下來,不會另外用trypsin打下來 08/13 19:52
LaiTzS: 放心 這株怎麼養都不會死的 08/13 20:00
Ianthegood: 奇怪 我找是英文比較多耶 之前養這隻的助理說這個丟進 08/13 23:09
Ianthegood: 垃圾桶都會長 08/13 23:09
grox: ATCC都會寫超詳細啊 大家有沒有follow就是另一回事XDD 08/14 00:10
grox: 這株cell line很好養 搖動敲擊那邊應該沒差 但要加medium打 08/14 00:11
grox: 以終止trypsin activity沒錯 08/14 00:11
a90648: google 239T culture->英文為主 293T 培養->簡體字一堆 08/14 10:02
Nicoleching: 用versene就好了,不用用到trypsin 08/14 19:57
twnndnpdnc: 我們實驗室是用citric saline讓細胞下來,我有同學直 08/15 12:59
twnndnpdnc: 接拿新的培養液暴力衝下來,都沒死 08/15 12:59
wanderchang: 這株養就對了 08/15 13:53
xxtomnyxx: 還是得說一句,雖然這株幾乎細胞隨便養medium隨便餵都 08/15 16:20
xxtomnyxx: 能活,但是養的不好還是會影響細胞增殖速度和transfect 08/15 16:21
xxtomnyxx: 效率。 08/15 16:21
wanderchang: 推樓上,養得活只是最低標準,有沒有得到想要的 08/16 15:27
wanderchang: 效果,還是要自己檢測 08/16 15:27
wanderchang: 所謂養就對了只是給beginner的信心,不是指隨便喔 08/16 15:29
a0976134: 養了一年的過來人跟您分享..這株細胞很好養,但貼附能 08/18 13:46
a0976134: 力確實比其他癌細胞來的弱。 08/18 13:46
a0976134: 基本上DPBS沖洗大力一點就下來了,但還是建議用Trypsi 08/18 13:46
a0976134: n讓細胞分離比較好,處理時間不用1分鐘。剩下的就照一 08/18 13:46
a0976134: 般培養細胞的方式就好。以10倍稀釋下去養,三天滿盤不 08/18 13:46
a0976134: 是問題。 08/18 13:46
a0976134: 如果你是要用這株細胞做實驗,加藥品的力道跟時間都是 08/18 13:48
a0976134: 考慮因素,不然絕對飄起來給你看。 08/18 13:48
rbcajyh: 細胞很小顆,種的時候可以種多一點 08/18 20:59
tynse71864: 樓上,可是他長很快阿 QAO 08/18 22:34
over999: 293t隨便養都活 08/20 16:20
over999: 繼代也懶得拿酵素 直接medium沖一沖再離掉就好 08/20 16:21
over999: 別爆盤都沒事 08/20 16:21
mtcoat: medium沖比用trypsin好 trypsin作用要在一分鐘內終止反應 08/23 11:22
mtcoat: 要不然很容易掛 08/23 11:22
yrj0372: Trypsin加進去晃一圈後吸掉,再用medium把細胞沖下來 08/24 09:50