[求救] 如何將96 well的medium和wash去除乾淨

[steve42125 (DrunkenBlue)]

大家好
關於96 well在操作上有些問題希望可以請教

最近在利用96 well做細胞在無血清環境中的耐受能力，
實驗是會在96 well內Seeding一定數量的細胞overnight之後，
將medium去除並以PBS wash之後，將實驗組換成不含血清的培養基

但是發現每次在去除medium和wash的PBS之後，
在顯微鏡下都會看到可能有些well內的細胞會突然"空"掉一塊
推測可能是用八爪去掉medium時有不小心刮到

我的操作流程基本上是：
會用八爪插上300ul的tip後再插上20ul的tip去吸掉medium
然後取200ul PBS抵著well的邊邊輕輕加入
再用相同的方式去掉PBS後補回相對應的medium

不知道各位在操作這種要對96 well內細胞去除medium並wash的實驗時
有沒有什麼技巧能不讓細胞有流失
另外想請問在我第一次有先將含血清培養基去乾淨的情況下
96 well以"200ul PBS wash一次"有辦法將血清去除乾淨嗎?
希望能得到各位的經驗分享
謝謝！

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推 jabari: https://goo.gl/hSo4Pg 用這種的吸 然後你的細胞是？
→ steve42125: 我們家只有8爪QQ  細胞是A549和1299 貼附型的肺癌細胞
→ steve42125: *H1299
推 lail: 也可以考慮用無血清培養基多清洗幾次，一般培養基其實沒很貴
→ lail: ，血清比較貴
→ steve42125: 對耶 Hmm.. 我都沒想到這個  謝謝你的建議!!
推 jabari: 看來你只能練空中甩盤了 PBS補到200 然後甩乾 不用拍盤
→ jabari:  重覆兩次必乾淨.. 至少我拿MDCK做TICD50這樣很OK 沒遇過
→ jabari: 血清干擾... 問題只在熟練程度而已Orz
→ steve42125: 我原本也是想說用這種方式看看XDD
→ steve42125: 只是在hood裡面感覺不太好操作哈哈
→ steve42125: 方便把甩的動作解說的詳細一點嗎?
→ steve42125: 我自己是想說快速反過來向下倒掉液體之後蓋在擦手紙上
→ steve42125: 把well洞口的液體沾乾 不知道這樣O不OK?
推 jabari: 拿一個乾淨的大petri dish 或大塑膠盆... 倒置之後在空中
→ jabari: 向下抖抖抖...震震震 多練幾次就熟練了XD 別用擦手紙啊
→ jabari:  我待過某lab是用金貝利面紙拿來吸 因為擦手紙髒髒會污染X
→ jabari: D
→ jabari: 就我經驗 pbs越多反而甩得越好越乾XD
→ MDCCLXXVI: 你是空邊邊 還是空中間？
→ steve42125: jabari: 了解了~  感謝你的分享XD
→ steve42125: MDCC:我是會空最外面一圈~