[求救] Polyacrylamide DNA gel 跑膠問題

[ararthur (RAYPTT)]

各位好，

請問在跑polyacrylamide DNA gel的實驗中，

若發生核酸只出現於Lane的左右兩側(特別是1, 1+)，無法形成完整的Band時，

可能會是什麼問題所導致，應該用什麼方法解決？

非常感謝。


Gel圖： https://imgur.com/XR4Em4B

實驗設計：

5% Polyacrylamide, 1xTBE, EtBr後染，25-30V, 2-3 hr, 各Lane分別為

M= 100bp DNA ladder;
1 .2 .3 = modified chromatin-IP DNA 進行PCR之產物 (10ul);
1+.2+.3+= modified chromatin-IP DNA 進行PCR之產物 (30ul);
NC= no template negative PCR control.

PS.  Sample是以Column purifed的chromosome DNA sample，再進行PCR後跑膠



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推 tynse71864: 跑 DNA 不熟…跑蛋白時倒是發現如果樣本體積太小，或
→ tynse71864: 沒混勻 (比如先加 dye 再 load一點點 Mr) 就會卡兩側
→ tynse71864: 解決方法 1.提升樣本總體積，補1x bfr。 2. 稍加pipet
→ tynse71864:  樣本，混勻 (gel well內或 tube 先 mix好都可以)
→ blence: 我猜well有鹽類析出,跑膠前對每個well都pipet一下
→ Ianthegood: overloading吧 看起來你的東西沒有需要用到page啊 aga
→ Ianthegood: rose不行嗎