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我是抽 cell culture 的 RNA 一般來說 protocol 會要求加 chloroform 後強力 vortex 2分鐘,離心後會有明顯均勻 的三層。 但是其它地方好像也有上下搖晃十幾下就好的方式,離心後最下方就會有不均勻透明層出 現 https://youtu.be/_nm2gzac-qw
想問一下有人知道這兩種做法抽出來的 RNA 的 260/280 260/230 quality 或是濃度有甚 麼不同之處嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 123.194.160.138 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1542458678.A.194.html
vancent: 重點是isopropanol沉澱久一點 其他還好 個人建議不要vort11/17 21:54
vancent: ex11/17 21:54
iyorain: 混勻後放冰上靜置,分層後再離心效果會好些11/17 23:25
iyorain: invert就可11/17 23:26
所以為了怕避免 DNA 或 chromatin 污染不建議vortex就是了是吧 ※ 編輯: MADAOTW (123.194.160.138), 11/18/2018 00:11:14 ※ 編輯: MADAOTW (123.194.160.138), 11/18/2018 00:11:41
Ianthegood: 怕你把rna搖斷 ph會把dna推到interface 11/18 05:54