→ xxtomnyxx: Digitonin 超難搞的,看能不能直接買 commercial 配好11/22 01:12
→ xxtomnyxx: 的 solution 吧11/22 01:12
不過買配好的溶液,放冰箱還是一樣會沉澱吧?
※ 編輯: tynse71864 (223.137.77.51), 11/22/2018 19:32:44
→ Ice9: 1、我是放到室溫使用。2、建議stock放-20°C。剛配置完就分 11/25 18:19
→ Ice9: 裝,用PCR的小管子裝10~20ul。解凍過後放4°C。久未用則丟。11/25 18:21
謝謝 ice大! 想請問你的久是一個月左右嗎?或是更短呢? 謝謝
※ 編輯: tynse71864 (223.140.178.46), 11/25/2018 21:51:48
→ Ice9: 約一到兩星期。大多是十天左右吧。 12/04 03:09
推 tommy770726: Digitonin很穩定 配5-10%放eppendorf存在4度冰箱 12/04 14:40
→ tommy770726: 要用前微波10-20秒看微波爐功率 比加熱融的快不用到 12/04 14:40
→ tommy770726: 95度就會全融了 它是固醇衍生物很穩定只怕被微生物吃 12/04 14:42
→ tommy770726: 我也是買了一小瓶破菌用了兩年還沒用完 12/04 14:44
→ xxtomnyxx: 最近要回頭試 Digitonin,因而查到一個有趣的 protocol 12/28 20:20
→ xxtomnyxx: ,這個 protocol 寫把 1g Digitonin 溶到 20 mL 水裡, 12/28 20:21
→ xxtomnyxx: 加熱到 95~98 度等他完全溶解後,放到 4 度至少 2 天, 12/28 20:21
→ xxtomnyxx: 之後把沉澱物過濾掉,這樣的 Digitonin 是 5% 的溶液。 12/28 20:22
→ xxtomnyxx: 所以說對這個 protocol 來說,那些在 4 度沉澱出來的東 12/28 20:23
→ xxtomnyxx: 西不是 Digitonin 而是雜質? 12/28 20:23
→ tynse71864: x 大我好像看過你說protocol, 他好像是說市售digitoni 12/30 18:05
→ tynse71864: n像是個混合物,需要回溶過濾或是再結晶析出的樣子? 12/30 18:05
→ tynse71864: 總之我試用2/3樓的建議,目前做 IF 染色結果還算一致 12/30 18:06
→ tynse71864: ,也有預期的結果 12/30 18:06
→ xxtomnyxx: Sigma 賣的兩種 digitonin 都不是純的,一個直接標明是 12/30 22:06
→ xxtomnyxx: ~50% (D5628),另一個要輸入貨號去查才知道 (D141),我 12/30 22:07
→ xxtomnyxx: 的 digitonin 是要拿來做 co-IP 的,純度對我的影響可 12/30 22:07
→ xxtomnyxx: 能很大,我手上的 digitonin (D141) 這管輸入貨號去查 12/30 22:09
→ xxtomnyxx: 他寫是 77.4%。我在想需不需要去測試去掉或不去掉沉澱 12/30 22:10
→ xxtomnyxx: 拿來做 co-IP 的結果如何,雖然我最後是要打 MASS 找未 12/30 22:11
→ xxtomnyxx: 知的 interaction protein,不過有已知的 protein 可以 12/30 22:12
→ xxtomnyxx: 用來做 co-IP 成功與否以及效率的 assay 12/30 22:12
→ xxtomnyxx: 話說,我的 digitonin 買來的直接加水都會先完全溶解, 12/30 22:13
→ xxtomnyxx: 連加熱都不用就溶得乾乾淨淨,要在 4 度放一陣子後才會 12/30 22:13
→ xxtomnyxx: 有沉澱,我還很納悶為什麼網路上都說要加熱溶解.... 12/30 22:14
→ xxtomnyxx: Preparation of Water-Soluble Digitonin 12/30 22:22
→ tynse71864: 咦D141就那2ml 包裝那管嘛! 我加水沒溶欸……還是有9 01/08 01:35
→ tynse71864: 5度水加熱 01/08 01:35
※ 編輯: tynse71864 (114.136.202.89), 03/21/2019 21:46:34