推 huangsw: ELISA會放大 沒tag 不代表不能純化啊......04/02 22:34
推 joseph103331: 硫酸銨或是陰陽離子交換法都可以純化XD04/02 23:07
推 joseph103331: 管柱很多,還有size-exclusive可以選04/02 23:09
→ joseph103331: 而且也不是affinity就比較純(幹04/02 23:10
推 Ianthegood: 表現量夠高 多過幾根column總是可以純化的 不過你要04/02 23:32
→ Ianthegood: 建standard curve可能還是得要MS或AAA04/02 23:32
推 fishg1216: 利用western blot推估濃度?04/03 01:42
推 Ianthegood: 樓上western跟elisa一樣 你得知道多少protein是多大04/03 15:47
→ Ianthegood: 根的band才行04/03 15:47
推 joseph103331: 做序列稀釋可以得到相對標準曲線,頂多就這樣04/03 15:55
→ joseph103331: 取總蛋白量跟吸光值畫圖,有這個curve也是可以04/03 15:56
→ huangsw: 考量到你要去測某種分析，勢必要提供mock當control。如果04/03 17:32
→ huangsw: 你終究要知道量跟純度，不如現在就開始想純化方法04/03 17:32
推 july81212: 先想純化方法吧 總要先有標準濃度才能去做減量線 ELIS04/03 18:29
→ july81212: A WB MS只是detection 而已04/03 18:29
推 july81212: 而且你有單株 大不了下重本直接conjugate beads去跑af04/03 18:31
→ july81212: finity04/03 18:31
推 ysfang623: 有抗體，可以做pull down assay去抓04/04 10:32
目前有commercials 已知濃度的目標蛋白可以當elisa standard control 請問這樣子可
以設計elisa assay來抓 cell lysate的目標蛋白濃度嗎？抱歉之前幾乎沒有elisa的經驗
，還請賜教，謝謝各位前輩！
※ 編輯: Marcus2014 (115.82.38.101), 04/07/2019 10:35:39
推 joseph103331: 是可以啦，不過為什麼不買這個做實驗就好? 04/07 12:36
推 Ianthegood: 你買得到standard sample夠純就跑BCA就好啦 浪費兩個 04/07 23:33
→ Ianthegood: 小時跑elisa幹嘛 傻傻的 04/07 23:33
→ Ianthegood: 然後對啊買得到幹嘛自己純化 04/07 23:33
推 michealking: 買現成的比就好了 04/12 00:46
推 rimo0169: BCA加一票 04/13 14:08
推 ararthur: ELISA是screen用的 不要砸自己的腳 簡單coomassie blue 04/29 13:53
→ ararthur: 跟commercial的對照先 純度也可以 04/29 13:54