[求救] Transwell染色後分析

[catmua0507 (生科小菜雞)]

各位前輩大家好
先來個前情提要
我對Transwell 完全就是新手
參考youtube abnova migration assay的protocol
後來微調用4%福馬林 fix 30min
0.5% crystal violet 染色 30 min
之後用PBS wash刮除上層細胞

在顯微鏡視野下有裂痕（皺摺）
是因為棉花棒戳的太大力嗎？

我目前是把chamber放在玻片上
但是發現很難對焦
（膜上小孔對焦，但染上紫色的細胞無法）
難道只能把膜割下來嗎？
（割下來邊緣都翹起，用蓋玻片也很難壓平）

不知道板上有沒有推薦的撇步呢？
希望前輩們不吝指教！
站內信留言都可以！感謝大家

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推 fengian: 目前也正在做，可以嘗試用10% acetic acid將crystal viol
→ fengian: et 去染，然後看是否要用ddH20稀釋後去測吸光值。（不知
→ fengian: 是否是我細胞數過多，感覺染完的細胞不太好數）
推 chinolocal: 裂痕可能是太用力了。不用割下來這麼麻煩，直接放在
推 chinolocal: 載玻片上就可以拍照了
推 rimo0169: 載玻片上滴一滴PBS，不要有氣泡，就比較好聚集
推 rimo0169: Chamber保持濕潤（但不是一直泡PBS)，細胞才不會縮
→ catmua0507: 謝謝大家分享我再試看看！
推 sianpa00: 我是直接把正面chamber放在破片上用顯微鏡看耶！這樣跟
→ sianpa00: 割下來不是一樣嗎？ 記得等風乾之後在去看，染色的細胞
→ sianpa00: 才不會被弄下來