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發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等)之分讓, 請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作簽署材料分讓協議(MTA),否則版工將逕行刪 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 如題 最近做Elisa 也跑出一些東西 但是有件很奇怪的事 我是測ova antibody 是用direct Elisa Elisa中做出來的standard是用序列稀釋 但是standard做出來 會是有點曲線 像這個樣子 https://i.imgur.com/1CuHvSb.jpg
當時覺得怪 但是看到有些人說把濃度取log2 就可以 我自己用也發現會很合 但是我印象elisa是用beer law 所以取log2就很奇怪 而且如果是beer law 那吸光值會正比濃度 但是也fit不起來 其他人做出來也是這樣 請大家幫幫忙 給點提示 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 1.162.61.70 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1558277315.A.97B.html
qumai: 不奇怪吧,本來線性關係就在一定的濃度範圍裡 05/20 07:32
qumai: ELISA還要考慮immobilize,你antigen濃度高到把well都 05/20 07:34
qumai: 填滿之後就不可能是線性了 05/20 07:35
huangsw: 簡單的說就是你的線性範圍有限 把高濃度踢掉應該就會直了 05/20 12:35
huangsw: 可以考慮加高substrate濃度看看吸光能不能拉上來 05/20 12:36
s505015: 不能 05/20 15:32
Ianthegood: 本來就不會是線性吧 而且好像也沒人真的fit log的方程 05/20 15:37
Ianthegood: 式都馬挑兩個點內插 05/20 15:37
s505015: 但這樣挑會不會很危險 05/20 17:46
Ianthegood: 會在那個ball park啊 需要那麼精準定量你就打MS或AAA 05/20 21:56
Ianthegood: 吧 05/20 21:56
Ianthegood: 挑最近的兩個點一上一下 差也不會差到看不到整體的tre 05/20 21:58
Ianthegood: nd 05/20 21:58
lail: 不然就把樣本稀釋到吸光值落在你覺得可信的線性範圍內去比? 05/26 15:35
s505015: 也是可以 但是蠻麻煩ㄉ 05/27 16:34
Ianthegood: 啊你就用log去fit啊 也沒差 05/27 17:08
qumai: 通常就是稀釋啦 05/29 09:33
duriamon: 去查4 parameter logistic function 06/03 03:03