→ Ianthegood: 嗯 為什麼真的不重要 你有抗體壓western嗎? 05/25 17:28
→ Ianthegood: loading control做好 勉強可以說是overexpression 05/25 17:28
→ Ianthegood: 然後你marker沒標誰知道15k那坨是哪坨 05/25 17:29
→ pinkyuyu15: !可是負控也是這樣,但我看paper上面的結果圖都沒有 05/25 18:17
→ pinkyuyu15: 這樣一坨然後就看到表現蛋白了!想說是不是沒跑好擠 05/25 18:17
→ pinkyuyu15: 成一坨才看不到 05/25 18:17
推 Ianthegood: sds-page不是什麼高科技,尤其是自己配的tris based, 05/25 18:24
→ Ianthegood: 沒有太多可以調整的地方, 如果你的host就是會有自己 05/25 18:24
→ Ianthegood: 的蛋白在那個size那1D的PAGE就是沒辦法分開來。壓west 05/25 18:24
→ Ianthegood: ern吧 05/25 18:24
→ Ianthegood: 然後標marker的意思是在marker旁邊標上代表的mw 不要 05/25 18:25
→ Ianthegood: 影響到膠本身的呈現 05/25 18:25
推 micocat: 有加lysozyme 嗎 05/26 18:07
→ yuasa: 真的想要分更開,可以考慮調膠的%,有一種gradient%的膠可 05/26 22:34
→ yuasa: 以買(pre-cast)。或者是跑更大張的膠 05/26 22:35
→ yuasa: 但如果真的完全重疊,跑再開也沒用。反正要做Western對吧? 05/26 22:37
推 alaric: Upper Gel 多跑些 05/26 23:34
→ shenhsu: 看paper上面的結果圖都沒有..你確定材料跟paper完全一樣? 05/27 16:45
→ shenhsu: 該不會paper的結果圖其實是western吧XDDD 05/27 16:47
推 ralph31567: 什麼都沒標很難幫 induce 前後有沒有差異? 萬一大小 05/28 23:01
→ ralph31567: 差不多,有沒有抗體可以做western? 05/28 23:01
→ qumai: 你要比較誘導前誘導後的band 還有沒有plasmid的菌的band 05/29 09:35
→ qumai: 那應該菌本身的蛋白質,你要分開就是純化你的蛋白 05/29 09:36
→ qumai: 不然就是像前面說的western 用抗體染 05/29 09:37
→ Qaaaa: 可以改另一個應該是tricine的buffer system 解析力會大增 06/02 15:08
→ Qaaaa: 如果實在沒有抗體的話 然後再改下膠的趴數 使你要的位置可 06/02 15:08
→ Qaaaa: 以拉的比較開 06/02 15:08
→ boy12345761: 蛋白質濃度好像有點高?well裡好像還卡很多 06/13 02:05
推 jinshiG: 跑2D 06/14 08:16