[求救] 細胞實驗-藥物濃度的計算

[momo2355115 (Anng)]

各位前輩大大好,

小妹我最近需要做一個加藥的細胞實驗,但由於我化學濃度的計算真的很弱…, 試著在網
路上看計算公式算,但花了半天的時間我還是不會QQ
所以希望有人能幫忙,如果能附上計算公式就更好了, 感激不盡!! (我好想搞懂這些濃度
間的計算/換算阿….)


實驗敘述:
需將兩個藥物加入養在35mm dish裡的細胞(是suspension cell), dish裡面會有 2ml的
medium

A. 藥物一是Estradiol且最後的作用濃度需為0.1nM。分子量是272.38, 我有250mg,
data sheet 上的敘述是說先用ethanol配置出20 μg/ml stock solution。可是該如何計
算與配製這個藥物,最後加入細胞後才會是0.1nM的作用濃度?

B. 藥物二是 estrogen receptors的抑制劑, 最後的作用需 為濃度10^?-7 μM。分子量
是
387.51, 我有5mg, 也是會溶於ethanol。也是同樣的問題,我該如何配製, 最後加入細胞
後才會是10^?-7 μM作用濃度?


先謝謝各位前輩大大了!
預祝端午佳節愉快!




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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 92.32.8.181 (瑞典)
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1559752481.A.CFA.html
→ xxtomnyxx: 第一個藥應該不是直接配成你的 stock，濃度差太多
→ xxtomnyxx: 摩爾濃度 (M) = mole/L，1 M 的溶液如果有 1 L，裡面
→ xxtomnyxx: 就有 1 mole 的溶質；重量百分濃度應該不用解釋吧？
謝謝解釋^_^
→ xxtomnyxx: 分子量的定義是 1 mole 的該物質會有幾 g 重。
→ xxtomnyxx: 如果照你所說第一個藥先配成 20 μg/mL，你要用 12.5 L
→ xxtomnyxx: 的酒精去配，實驗室不會幹這種蠢事.......
Data sheet 上面是說，用1ml 酒精與1mg的藥物一溶，再加入49 ml medium 配成 stock
。如果stock是20ug/ml，我該如何操作加藥才能是最後的0.1nM作用濃度呢 @@
→ xxtomnyxx: 建議你去查一下第一個藥對酒精的最大溶解度，比較可能
→ xxtomnyxx: 的配法是先配成幾 mL 可能是 10~100 mg/mL 的保存溶液
→ xxtomnyxx: ，再取出部分稀釋成 20 μg/mL 並分裝保存。
→ xxtomnyxx: 瑞典！？
對 遠在瑞典的求救@@
※ 編輯: momo2355115 (92.32.8.181 瑞典), 06/06/2019 02:41:08
推 tynse71864: 第一個酒精是2.5mg/ml , dmso 則是 20mg/ml ; 看是否
→ tynse71864: 溶在 DMSO中會比較好處理
推 tynse71864: 若是 DMSO 飽和濃度相當于 20/272.34/1= 0.0734M  (有
→ tynse71864: 錯樓下請救我)
→ raiyu: 我有個小小疑問 酒精會揮發這樣的stock濃度準嗎??
→ raiyu: 因為我是習慣用DMSO溶的
→ raiyu: 我的習慣是將藥配成final濃度的1000x 加藥時直接1000x稀釋
→ raiyu: 所以dish裡2ml 就加2μl的藥
→ raiyu: 依照你目前的條件 A藥 1.先算出20μg/ml(20μg,1ml)是多少M
→ raiyu: 然後再把它調成0.1uM，然後加藥時2ml加2ul，final就會是
→ raiyu: 0.1nM
→ raiyu: B藥也是照這邏輯配
→ raiyu: 只是我的小疑問酒精揮發及medium配的保存上會不會容易汙染?
→ raiyu: 如果是我的話會直接用DMSO配成10mM的stock，要用的時候再1
→ raiyu: 0x連續稀釋到0.1uM
→ raiyu: (有錯的話請小力鞭）
→ blence: 放-20不怕酒精揮發,加到medium後,更不擔心揮發了
→ blence: E2我是配成10mM與10uM的stock,用之前在外加入medium
→ raiyu: 感謝樓上（？）答覆
謝謝大家的答覆、協助與解釋！！
最後我的確是用酒精配置E2，stock儲存在-20.，再同大家所說的連續稀釋！
謝謝大家，祝福各位前輩的實驗超級順利:D
※ 編輯: momo2355115 (94.234.36.154 瑞典), 06/13/2019 02:00:17