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※ 引述《yayayoyi (drip brew)》之銘言: : 最近用AKTA FPLC時, : 由於管柱壓力有點提高, : 想說可能有些蛋白卡在裡面, : 於是就用0.5M NaOH 0.5ml/ml洗一下(之前用同樣方式洗過) : 結果壓力就開始很不穩... : 如下圖 : https://i.imgur.com/ABWCVI3.jpg
: https://i.imgur.com/Zk6XGb9.jpg
: 現在正在用水洗,但由於管柱壓力慢慢的在上升... : 導致在洗的時候一直overpressure : 原本速度1.5ml/min : 現在降到0.5ml/min... : 誰來救救一下是那裡出問題了為何壓力會一直上下波動 : pump進空氣?還是那個吸buffer的閥怎麼了嗎… : 要如何排除呢? : 不然就是要聯絡HE的廠商了... : 感謝各位前輩~ 先講結論 管柱已經沒救了,建議換一隻新的管柱 管柱拿下來以後,先把管線裡的液體置換成水 接著去找一個東西叫做purge kit,它看起來像是一個針筒接著一段矽膠管,矽膠管的尖 端會有一個接頭。 你用的機器叫做AKTA Prime plus 在機器正前方有個看起來像是六遍型的pump head Pump head上應該有一個可以用手轉開的接頭 不知道是哪個頭的話,試著把它轉開,應該會滴水出來。 接著把purge kit的接頭接上pump head的接頭。開始抽吸pump裡的液體。大概吸個50ml左 右。然後把pump head的接頭鎖緊。 之後設定B%=50, flow rate 20, 3 min 結束後改成B%=0, flow rate 2 UV應該就恢復正常了。 如果沒正常。打機器上的0800電話去叫修 Pump 壓力有波動是正常的。因為你的間隔是規律的,但可能機器久了波動很明顯。 你的root cause在於: 肯定進了空氣,比較可能是inlet端進去的。因為你的導電值並未隨著鹼性溶液的進入而 升高,反而下降。這只有兩種可能: 1. 你打水 2. 你打了空氣 從UV的振幅跟頻率來看應該是2 另外一件事很重要說三次: 不要逆洗 不要逆洗 不要逆洗 逆洗不是不行。而是大部分的人會誤判逆洗的使用時機。這只會造成更嚴重的後果跟麻煩 。 以上隔空抓藥,請不吝賜教 另外製造商是GE -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 223.136.144.22 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1562839091.A.31E.html