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不知道版上有沒有人做過 HA,最近遇到一個問題,不知是否有人可以指點迷津。 我之前做的時候是 viral capsid 加豬的 red blood cells,放冰箱一個小時後,會出現 suspension 的現象,沒有加 capsid、單純用 PBS 的 control 其紅血球則是會沉下去 。 不過最近做不知道怎麼回事,capsid 都不會出現 suspension 的狀況,提高 capsid 濃 度或是換了 PBS 還是一樣。 前兩天試了新的 batch of capsid 和新的 red blood cells,放在冰箱 40 mins 後拿出 來看,舊的和新的 capsid 都有 suspension,但是拿出來在室溫的情況下,二十分鐘內 就都又沉下去了(之前放了半個小時都不會這樣,再放回冰箱放隔夜還是 suspension) ,但一直找不原因,除了 capsid 外能換的都換了,不知道有沒有大大遇過類似的情況, 可以指點一下嘛?QQ 感謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 72.143.236.69 (加拿大) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1570830821.A.D9D.html ※ 編輯: ad1980 (72.143.239.29 加拿大), 10/12/2019 07:12:09 ※ 編輯: ad1980 (173.181.83.100 加拿大), 10/12/2019 09:53:01
nprotei: 以前經驗是只會在一個時間點觀察 例如室溫30min後 10/12 11:47
nprotei: 之後有可能會變化 例如全部沉降 可能跟測的病毒有關 10/12 11:48
nprotei: 要測試 RBC 或是你的蛋白 (或整個步驟 10/12 11:50
nprotei: 感覺可以先拿已知濃度的病毒來試 10/12 11:51
ad1980: 我之前用 capsid 400x dilution 做都沒問題,但是某一天開 10/13 00:36
ad1980: 始,同樣的 dilution 就全都下沉了,buffer 和 PBS 都是一 10/13 00:36
ad1980: 樣的,除了那陣子豬血用完換了一瓶新的,但最近又換了一瓶 10/13 00:36
ad1980: ,還是一樣的情形,完全無法理解為什麼突然就無法 suspens 10/13 00:36
ad1980: ion。QQ 10/13 00:36
nprotei: 之前出現像你們這麼大的差別 我們是懷疑是動物血的供應商 10/13 09:24
nprotei: 因為只是私人的販售者不是公司 懷疑他隨便賣有問題的血 10/13 09:25
ad1980: 嗯嗯,我們是跟 Cedarlane 買的,應該不會有不穩定的情況 10/15 22:58
ad1980: 。QQ 10/15 22:58