[求救] 我的RAW264.7細胞一直活化...

[t0953337796 (芋頭)]

如題，我不管是解我們實驗室的細胞或是從食工所買回來的raw264.7都會在解完之後沒多
久開始活化,也就是長腳。
我使用的medium 是直接買Gibco 的liquid的DMEM 再另外加10% low endotoxins 的FBS。
想請教各位是如何培養這株細胞避免他活化的呢？
有沒有大佬可以提供一點這個細胞給我，本人在台中，其他地區也可以，為了畢業我願意
跑XD

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推 darrenyo: 解細胞最好離掉DMSO 2-3天一定要換medium
→ darrenyo: 大約7成滿就要繼代 不能長滿
推 tynse71864: 想問版上有人raw養到完全不長腳的嗎? 我自己每次都至
→ tynse71864: 少會有10-15%左右長腳的...
推 seansean4567: 有圖片嗎？
→ seansean4567: 前一陣子也很糾結長腳，但傳了幾次圖給BCRC皆說正常
→ seansean4567: ，滿一點會變圓。
→ seansean4567: 而且你有簡單測一下NO看與LPS誘導的有差別嗎？
推 oysterChiu: 建議第一天直接解在dish裡，隔天用PBS wash一下把DMSO
→ oysterChiu: 洗掉，換新的medium
推 money1015: 要加L-glutamine
推 wjlmaxetlott: ATCC上的morphology也是有長腳的 是正常的嗎？ 現在
→ wjlmaxetlott: 只有養老了才比較圓
推 machin: 建議繼代時不能用Trypsin,很容易活化,直接加PBS用力將細胞
→ machin: 打下即可
→ goodmood1988: Raw容易活化 不要太糾結 不然你的人生會過的很阿雜
推 tynse71864: 我後來跟 g 大一樣，只要不是整盤長腳我都繼續用orz
推 b0109135: 我會用單包裝的滅菌刮勺輕輕掛來繼代
推 sweetE: 我也是用單包裝的刮勺繼代，養在10cm dish裡，細胞泡在10m
→ sweetE: l PBS輕刮即可，沒有活化的問題。（by 博士班養了五年的我
→ sweetE: ）