→ Qaaaa: 如用DMSO稀釋你要看最後的working conc.是否會超過細胞毒性 04/25 14:41
→ Qaaaa: 容許的DMSO濃度 如果是要做細胞試驗的話 04/25 14:41
確實是 也就是說也不能把藥物泡的太稀
使得最後在配到medium時DMSO的濃度過高而影響細胞囉?
所以我才想說further dilution能不能用PBS之類的 又怕影響藥物
※ 編輯: steve42125 (120.126.49.54 臺灣), 04/25/2020 14:55:50
※ 編輯: steve42125 (120.126.49.54 臺灣), 04/25/2020 14:56:20
※ 編輯: steve42125 (120.126.49.54 臺灣), 04/25/2020 15:00:16
推 perdedor: 一般來說，細胞實驗可以容許有0.1%的DMSO，但你也要用0. 04/25 16:03
→ perdedor: 1%DMSO做一個vehicle control。最好還能做一個0.1%的 04/25 16:04
→ perdedor: cytotoxicity test。所以你算算就知道stock該配多濃了。 04/25 16:04
→ perdedor: 然後，不要用filter過濾DMSO一般filter耐不住。有點擔 04/25 16:05
→ perdedor: 心你的實驗因為這些問題很基本，你們實驗室裡沒有更有經 04/25 16:05
→ perdedor: 驗的人可以請教嗎? 04/25 16:05
推 perdedor: 如果只是蓋子裂開(小裂)而且DMSO是收在culture room的櫃 04/25 16:08
→ perdedor: 子裡，我會繼續用啦。畢竟DMSO蠻毒的。就看你個人多在意 04/25 16:09
謝謝您的完整推 目前實驗室確實沒有人可以請教了QQ
確實有耳聞DMSO對細胞的高毒性
這部分確實我有打算先做個測試
而後在正式實驗時帶一個您說的vehicle control
再次謝謝經驗分享 感謝！
※ 編輯: steve42125 (120.126.49.54 臺灣), 04/25/2020 17:02:07
推 soend: DMSO可以用特殊材質的filter過濾，你可以問一下廠商，如果 04/25 20:29
意思是說 在回溶到1mM時一樣用DMSO 而後再用medium稀釋成20uM保存供後續實驗處理用囉？
→ soend: 你實驗是細胞實驗，我的作法是稀釋在medium去做序列稀釋， 04/25 20:29
→ soend: 當然還是要做DMSO的control 04/25 20:29
※ 編輯: steve42125 (223.137.183.135 臺灣), 04/25/2020 23:44:17
推 perdedor: 我舉個例子好了…假設你用12-well種細胞，所以每一個 04/26 23:26
→ perdedor: well有1 mL的medium。一般細胞藥理實驗，0.1%的DMSO是可 04/26 23:26
→ perdedor: 接受的，因此你可以直接用pipette加1 uL溶於DMSO的 04/26 23:26
→ perdedor: antagonist到每個well。假設你希望最終作用在細胞的濃 04/26 23:27
→ perdedor: 濃度是20 nM好了，你stock就配antagonist, 20 uM in DMS 04/26 23:28
→ perdedor: DMSO。如果希望DMSO只有0.05%。就配40 uM然後加0.5 uL ( 04/26 23:28
→ perdedor: 你技術ok的話可以加得準)。既然你會有vehicle組別，就 04/26 23:29
→ perdedor: 不必太擔心無法控制變因。除非你的antagonist水溶性不 04/26 23:29
→ perdedor: 不錯，不然DMSO通常是最好的選擇。然後要溶於水的話， 04/26 23:30
→ perdedor: 用水就可以了，不用加medium，反正你還是要做水的 vehic 04/26 23:30
→ perdedor: cle (雖然加不加沒差)。 04/26 23:31
P大 真的很感謝你的解釋和舉例
我現在完全清楚我的Stock和後續Working時要怎麼製備了
真的很謝謝您！
※ 編輯: steve42125 (120.126.49.54 臺灣), 04/27/2020 11:07:29
推 taya1991: 其實你可以乾脆用自己的細胞來試試看，比方會加100的 04/28 18:19
→ taya1991: DMSO，那你就分一盤出來加加看會不會影響細胞，順便看看 04/28 18:20
→ taya1991: 那罐蓋子裂開的DMSO會不會因此長菌~ 04/28 18:21
→ taya1991: 當然，能買新的最好，也穩定，免得都沒長但突然最後一份 04/28 18:22
→ taya1991: data長了...........要重做就欲哭無淚 04/28 18:22
→ NKTcell: DMSO蓋子裂開最好不要再用了 濃度會改變 04/28 22:05
樓上兩位的建議確實也很有道理 我在強烈請求老師看看XD
※ 編輯: steve42125 (120.126.49.54 臺灣), 04/29/2020 10:44:16