[求救］如何確定protein和NADPH有結合

[Shalexx (啃琳)]

       最近純化了一個enzyme，他的cofactor是NADPH，substrate候選人也準備好了，
想測這些substrates能不能被這個enzyme作用。
        因為這是一個新的enzyme，substrate是預測的，還沒有positive control，所
以不知道怎麼確定enzyme是不是有活性。

        目前的想法是，希望在和substrate作用前，先透過protein和NADPH的結合來確
定有沒有活性。

1.不知道這是不是個可行的方法？

2.如何以簡易方式偵測兩者有binding？查了有些方法都是以偵測NADP+/NADPH為主，但我
是希望NADPH不要有氧化還原反應。


        想請問各位專家們有沒有經驗，或是解決方法~~謝謝~~

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推 yayayoyi: 看substrate or product吸光值 反應完測一下？
→ yayayoyi: 會不會binding 用LC-MS
推 monkey60391: 用isotope label H3?
→ Shalexx: 謝謝！~~