[討論] Protein 在MALDI-TOF出現dimer

[janewu945 (I am who I am)]

最近使用MALDI-TOF打某個protein
出現了dimer 的現象
想問這種狀況是因為為什麼呢
會因為不同的細胞培養後純化的關係
（比如使用HEK293cell 與CHO cell)
還是本身蛋白質純化後就會有這樣的狀況
或是跟protein後面接的tag有關係呢？


我是直接買廠商純化後的蛋白上機，
並不是自己養細胞完純化。
蛋白質是接Fc
Dimer 情況是未做過reduction & alkylation，
單純加上matrix 直接上機。

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推 Ianthegood: 因為protein會dimerise?
→ xxtomnyxx: 印象中 Fc 好像本身就容易 dimerize
有相關paper可以驗證嗎？謝謝
※ 編輯: janewu945 (49.216.30.174 臺灣), 01/15/2021 09:52:51
推 mgx1024: Fc 有包含 hinge 嗎？
→ xxtomnyxx: 有沒有paper我不知道，這算是經驗吧？之前表現 Fc 和
→ xxtomnyxx: Fc fusion protein做western blotting，Fc的lane如果量
→ xxtomnyxx: 下多就會在兩倍分子量的位置出線訊號，連SDS-PAGE這種
→ xxtomnyxx: 環境它都能dimer了，一般沒denature它應該更容易dimer
推 ganbaba: 買來的Fc通常都有disulfide bond，所以會形成dimer，即使
→ ganbaba: 加reducing reagent也有可能少量鍵結回去形成dimer