[求救] 單點突變的mouse genotyping

[pent (有人試我的密碼，幹)]

以前只做過有插入tag或是Knock-out的mouse genotyping，

現在工作上有老鼠
只在單一個nucleotide做point mutation(A/C or T/G)，
實驗室以前都是做出來送sanger，
不知道板上的各位有沒有啥方法
可以降低成本，能不能只跑膠或是real-time PCR的方式
就能分出genotype?

Thanks


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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 39.13.3.70 (臺灣)
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※ 編輯: pent (39.13.3.70 臺灣), 08/20/2021 11:11:21
→ blence: Taqman,自己設計primer跟probe,分別標FAM跟VIC或HEX
→ blence: 如果是已知的位點或許Thermo會有set,不過老鼠的機率不大
推 jabari: HRM
→ ganbaba: 看有沒有新增酵素切位囉，有的話就PCR 切酵素 跑膠
→ xxtomnyxx: 你搜尋「SNP genotyping」就有了，用LNA做probe準確度
→ xxtomnyxx: 很高
推 osla30: Mutagenically separated polymerase chain reaction (M
→ osla30: S-PCR)
→ osla30: 跑膠就能分，只是膠的%數2%以上比較好