推 jabari: 去看addgene的plasmid 101系列 11/09 12:53
推 satantaco: 當然會有產物 Plasmid依然是核酸 當然跑膠就會看得到 11/09 14:21
→ satantaco: 需要留意的是 plasmid因為結構關係 跑的速率會不一樣 11/09 14:22
→ satantaco: 因此如果跟標準品對照相對位置 會有一些大小的落差 11/09 14:23
→ satantaco: 不過實驗上需要留意 你的plasmid有多大size 電泳要跑 11/09 14:24
→ satantaco: 多久 跑太短 位置會不會太上面 不容易看 跑太長會不會 11/09 14:25
→ satantaco: 跑到跳海 需要做一些預估 11/09 14:26
→ satantaco: 不過這相對也跟膠的濃度有關 去google找一下原理 11/09 14:27
推 monkey60391: plasmid用kit抽出來的濃度很高, 11/09 16:09
→ monkey60391: 所以不用像DNA片段要再透過PCR放大才看得到 11/09 16:09
→ monkey60391: 通常plasmid跑膠應該會用限制酶切一兩刀 11/09 16:09
→ monkey60391: 去看片段大小有沒有符合預期吧 11/09 16:09
→ Ice9: 學長姐恐怖是什麼意思?再恐怖還是要盧一盧啊,這關乎你的 11/09 16:15
→ Ice9: 權益和……畢業。 11/09 16:15
推 Ice9: 另外,你老闆說的順便跑 gDNA應該是其他或後續實驗要用到的 11/09 16:18
→ Ice9: ,要先弄清楚是不是沒測過濃度或放太久了。 11/09 16:18
推 huuban: 有辦法先測濃度嗎? 通常是用限制酶切成線性再跑膠吧 11/10 23:11
推 ss0545202: 通常是用限制酶切完跑膠看band大小有沒有符合 但首先 11/11 23:56
→ ss0545202: 你要有質體的map 這樣才知道要用哪個限制酶切 通常找 11/11 23:56
→ ss0545202: 只有1-3個切位的酵素來切 11/11 23:56
→ ss0545202: addgene的blog很多資訊可以看 或找current protocol看 11/11 23:58
→ ss0545202: 一開始我也是看那些自己學著做 11/11 23:58
推 agagy: 就像樓上說的,沒有用限制酶確認過都不可信 11/14 02:45
→ song4231: 謝謝樓上各位大大的指教,小妹受教了,的確是需要利用 11/25 15:21
→ song4231: 限制酶切過才會好辨認(我的理解是這樣),所以之前很 11/25 15:21
→ song4231: 糾結為什麼跑不出來(只跑plasmid), 謝謝大家! 11/25 15:21