[求救] 求救 medium不小心加熱到62度能用嗎？

[dawnga (Dawn)]

養細胞用的medium/DMEM+10%FBS

剛剛準備繼代，使用前用水浴槽加熱
我們的水浴槽是壞的（無法恆溫）
會一路一直升溫
（從20度到40度約5分鐘）
（40度到60度不到十分鐘）

因為忘記按計時器去關掉
剛剛一路從室溫20度加熱到62度
在62度時被我發現

請問這樣medium還能用嗎？
謝謝


補充：有聽說去補體是56度30分鐘
我的medium從56度升到62度應該只有三分鐘



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→ robbercat: 可以取一點medium出來養養看
好的！謝謝
→ xxtomnyxx: 看你養什麼細胞，239T的話我想是沒問題
推 tynse71864: 同一樓  這個最簡單
→ tynse71864: 或是就直接丟了  省得後續實驗問題抓不完
也是 總比日後有問題還要懷疑medium
→ xxtomnyxx: 如果你這個 medium 是要做 assay 的，建議你換新的；如
→ xxtomnyxx: 果是純粹拿來 maintain culture，我覺得還好，頂多補 1
→ xxtomnyxx: 倍 glutamine；不過除非你這罐體積很大(超過500 mL)，
→ xxtomnyxx: 實驗室又很摳，不然的確倒掉配新的最安全。
了解！最後決定換掉了  謝謝
→ untilnow: 一台水浴槽沒多少錢, 換一台吧
推 agagy: 1. 配新的，不要浪費時間去測試
→ agagy: 2. 快換一台水浴槽，實驗室沒經費叫老師自己掏錢買
→ agagy: 省錢不是這樣省的….
老師其實知道這件事==
→ blence: 拿來當wash buffer,或是細胞detach後拿去離心前當trypsin
→ blence: neutralization buffer
→ blence: 以這加熱速度,62度應該也不是medium裡面的溫度
對！我也是這樣想的！但是避免疙瘩還是換掉了
推 kubon111: 弱弱的問 medium這樣溫度過高對細胞生長會有特別的影響
→ kubon111: 嗎
→ xxtomnyxx: Medium base 本身的 glutamine 高溫容易降解，如果已
→ xxtomnyxx: 經加了 serum，serum中的 growth factors 有可能回變
→ xxtomnyxx: 性失去作用導致細胞缺乏生長訊號而死亡。現在其實只要
→ xxtomnyxx: 不是做免疫相關、對補體敏感的細胞培養，都還建議連56
→ xxtomnyxx: 度30分鐘的去補體都不要做了
推 lemonteas: Medium也曾經被別人用56度煮半個小時，繼續養Cancer ce
→ lemonteas: ll，他們還是長得很好
→ lemonteas: 推agagy，擔心的話拿來咖細胞吧!
推 darlene917: 丟了啦!!不要鬧了!!
→ darlene917: 你之後養出來做的實驗數據你會想要加註這條嗎?
→ darlene917: 看推文發現做實驗這麼不嚴謹的人還真多耶 = =!!
推 darlene917: 剛好用這件事跟PI要求說換一台新的啦!!不然還會再發生
→ xxtomnyxx: 真的要嚴謹，就直接 define medium 了，用FBS本身就已
→ xxtomnyxx: 經是不嚴謹的事了(切身體會過換一批FBS就完全做不出來
→ xxtomnyxx: 的痛苦)，然後樓上說的，用這件事去跟老闆說要換，只會
→ xxtomnyxx: 被老闆罵說在旁邊好好顧就好，自己不專心怪誰！
→ xxtomnyxx: 我覺得要不是他們實驗室就是這麼摳，原PO也不會因為這
→ xxtomnyxx: 點小事跑上來問吧
你好專業，也好瞭解實驗室生態歐 謝謝你以上的建議
→ a90648: 之前換了一批FBS之後MEL就無法分化了，嚴重的甚至養不活
好的謝謝
推 MartianIT: 讚成拿來洗細胞或去活trypsin
好的謝謝
推 agagy: 不知道原PO是養什麼細胞，cell line可能還好，本身就強壯
→ agagy: 養primary cell 可能直接死給你看..growth factor都失活了
推 MartianIT: 話說 以前養細胞除了做soft agar culture之外 medium
→ MartianIT: 我都是冰箱拿出來避光放室溫就用了
※ 編輯: dawnga (49.215.34.219 臺灣), 01/06/2022 01:25:28
推 leptoneta: FBS只要實驗都用同一批號哪會不嚴謹...
推 song4231: 我學弟之前不小心放在學姊設好要設補體的56度裡至少半小
→ song4231: 時，後來我提醒他趕快拿出來，還是能用ㄟ