[討論] RNA純化疑問

[Renina (貓尼醬)]

 
各位前輩好，不好意思勞煩各位替小女子解惑
 
在RNA純化的實驗上，有些疑惑
 
關於均質時使用的Trizol、 Trisure試劑
與幫助層析的Chloroform 、BCP試劑的作用體積
 
 
本實驗室舊的 protocol是標注
sample加0.5mL的Trisure+0.05mL的BCP
 
但新的技術指導者傳授的protocol為
0.5mL的Trizol即加入0.15mL的chloroform
 備註：其他前輩的protocol我都有參閱過，先不論Trisure Trizol。我亦有在其他人的proto
col看到 加入0.25mL Trisure 配上0.1mL 的BCP
勞煩前輩回覆問題 著重在比例而非材料來源


謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 163.15.178.40 (臺灣)
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1653388072.A.256.html
推 leptoneta: 用不同的材料 當然比例不一樣
→ Renina: 一樓妳好 我有參照其他protocol
→ Renina: 無論材料問題
→ Renina: 其比例都不一致
 
※ 編輯: Renina (163.15.178.40 臺灣), 05/24/2022 19:53:40
→ blence: 不管是Trizol或Trisure,原廠的說明來看,內文比例都不對
推 leptoneta: 通常Tri:BCP是10:1 或Tri:氯仿是10:2
→ Renina: 在此感謝以上三位的協助，感激不盡
→ Renina: 若其他版友/前輩有想補充的部分，也歡迎您們指點，謝謝
推 chungrew: 材料明顯是變因
推 dubius: 我的lab用10:1或是10:2 不論bcp 或chloroform我測試過並
→ dubius: 未有太大差別
→ dubius: 你也可以測試一下自己的系統
→ dubius: 有時候某些protocol是為了節省 而非獲得最佳結果
→ Renina: 感謝前輩指導
→ untilnow: 重點在測試自己的系統,別人的食譜不見得適合自己