[求救] H1299 細胞型態異常

[steve42125 (Shiburin)]

各位好，
用H1299細胞進行實驗到現在已經約3年還是第一次遇到這個無解的問題，
最近細胞養到後面會有明顯異常的型態變化，但遲遲找不到可能的原因，
希望對細胞培養有經驗的前輩能分享一些看法。
https://imgur.com/2lQiF4i
https://imgur.com/6AqjJoR
上圖為該細胞從液態氮解凍48小時後的型態，
看起來排列規則整齊，培養基背景乾淨，一切正常。
https://imgur.com/IfryXQA
https://imgur.com/afmPpic
上圖為最近細胞培養大概6-7代之後開始細胞會有很明顯異常的型態變化
看起來會有點皺縮和爛爛的樣子，且背景的細胞碎屑明顯增多，
有確認過非細菌和黴漿菌汙染，
培養箱最近也有校正跟滅菌過，
實驗室另外一個養該細胞的同學也沒有遇到這種情況，
我自己也是第一次遇到，有把medium跟FBS全部換新但還是發生一樣的情況，
已經被這問題困擾3個多月沒辦法進行實驗。
不知道有沒有人有遇過類似的問題，或著能分享可能可以修改的地方？
若有需要我提供更詳細的資訊也請告訴我，謝謝！

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→ Bows: 你細胞是不是有點太滿了，你上面第一張圖也有這種transform
→ Bows: ation，有時候密度也會影響，我1299是沒有遇到這種狀況，但
→ Bows: 有其他株是密度太高就會變形
推 jamesonly: 同樓上覺得有點滿
→ steve42125: 謝謝樓上兩位提供的看法，其實最近再更細節觀察發現還
→ steve42125: 會伴隨trypsinzation沒辦法完全detach細胞的狀況，我
→ steve42125: 會嘗試看看再較低的confluence進行繼代，先謝謝兩位了