關於 Confocal 細胞核刮痕和溢出來的感覺

[Rudeus (Rudeus)]

想請教各位 Confocal 大師，最近在做 Confocal 的時候是以 Hoechst33342 進行細胞核的
染色，不過有時在 Confocal 的目鏡下會覺得細胞核上好像有刮痕，另外有時候會覺得細胞
核外側好像會有一圈淡藍色痕跡，不過真的上到機器拍照時又看不出來。想問問是否有其他
人有一樣的經驗，要如何改善呢？
另外，也想請教若我想看的 signal 主要位於細胞核，上述提到的現象並未影響到想看的蛋
白，此外，該蛋白也呈現預期的結果，這樣的 data 是否能夠使用呢？（因為感覺上述看到
細胞核奇怪的現象是在染色時才發生的）

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→ xxtomnyxx: 我記得confocal通常只有對相機的通道有共厄焦成像，目
→ xxtomnyxx: 鏡看應該是沒有共厄焦的，所以有看到光暈但相機沒有應
→ xxtomnyxx: 該很正常
→ xxtomnyxx: 通常是以拍照的圖片為準啦
推 tynse71864: 拍起來正常應該就還好   有時候是肉眼鏡頭 (？)的關係
推 Kiyoda: 肉眼是一般螢光顯微鏡,一樓是對的.pinhole只在相機那條光
→ Kiyoda: 路上,如果想在螢幕上看到肉眼的樣子的話,把pinhole開大就
→ Kiyoda: 好囉