推 maurice9325: 看起來是膠或是蛋白有問題。膠借別人的材料試試看，12/17 20:28
→ maurice9325: 或是請跑出來正常的人幫你配一片膠。另外蛋白質如果12/17 20:28
→ maurice9325: 是直接收沒定量或是組織檢體，建議重複冷凍後多煮幾12/17 20:28
→ maurice9325: 次。12/17 20:28
推 maurice9325: 阿阿，沒看到已經有用其他膠。那marker漂亮嗎，試試12/17 20:30
→ maurice9325: 看從蛋白前處理改善看看。因為從fig 2，可以看到跑12/17 20:30
好的感謝
→ maurice9325: 完膠的結果就很怪了。12/17 20:30
推 Qaaaa: 看起來像樣品沒純化乾淨 很多時候如gDNA沒去掉 大分子會在12/17 21:20
好的，我再試試DNase跟sonication
→ Qaaaa: 跑膠時於上方拉扯而變成這種撕咬感12/17 21:21
→ xxtomnyxx: 42 kDa拖條除了DNA以外，還有可能是下太多蛋白了 12/17 22:03
一開始下10ug的蛋白，但17那條太少了看不到，42還是有拖尾的現象
→ xxtomnyxx: 你的 transfer buffer 配方是什麼？有加SDS嗎？12/17 22:04
我是直接買bio-rad commercial 的transfer buffer來稀釋，沒有加SDS
→ xxtomnyxx: 順便問個你用的跑膠系統是哪個廠牌的？12/17 22:07
跑膠、transfer的機器跟buffer都是用bio-rad的
※ 編輯: soyokenny (123.195.77.180 臺灣), 12/17/2024 23:04:39
推 darrenyo: Marker如果沒歪樣本歪那就是 樣本前處理的問題吧12/18 13:47
推 Renina: 跟廠商要pre casting gel試用品跑一次看看，看起來就是膠12/25 13:22
→ Renina: 的問題12/25 13:22
→ Renina: glycine有沒有受潮呢 12/25 13:22
→ Renina: 其他東西有沒有過期或是混到別的液體，濃度有沒有配錯呢 12/25 13:22
推 jockersung: 已私有可能是鹽類跟dna等等的影響。除了加dnase外，可 12/26 19:15
→ jockersung: 以用cutting column 去掉10k（或是5k 1k的）以下的跑 12/26 19:15
→ jockersung: 看看 12/26 19:15
推 tynse71864: 想問樣品怎麼處理的? 我家也是 biorad commercial全套 12/28 20:54
→ tynse71864: 但偶爾發現樣品很黏稠 (太濃或有 DNA ) 就可能會這 12/28 20:54
→ tynse71864: 樣12/28 20:54
推 nuwoos: 小分子蛋白跑到一半就要停吧。01/03 23:10
※ 編輯: soyokenny (118.169.82.38 臺灣), 02/04/2025 16:29:28