[實驗] HPLC column accucore aQ保養

[scy2468 (scy)]

各位高手好，有問題請教
實驗前有先用 水/甲醇(50%50%)condition一個小時
實驗後也用水跟甲醇以緩慢流速梯度清洗一個多小時
但是這隻卡冷已經是第二支了
卡冷五個月就死一支

(規格:100*2.1mm     2.6um)
已經觀察幾個地方
一.壓力與以往相同。
二.溶劑為單純甲醇及5mM醋酸銨水溶液(配完有震盪過)，都為新鮮現配。
三.條件沒有改變過(LC分析溫度30度)。
四.樣品前處理有用2um孔徑過濾器過濾，樣品是乾淨的水。
五.最終保純是在水/甲醇(10%/90%)，平日最長放置14天沒有使用。

目前發現問題:
分析物(較親水的)滯留時間會改變，提前流出，而且時而正常時而不正常。
正常時分析物的感度訊號良好與以往同
不正常時根本無法定位分析物位置...

還請各位高手提點教導
是否有該注意的地方遺漏了
小的愚鈍Q_Q
謝謝!!

__________________________持續更新中

對了，我的流速都設定在0.25ml/min

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※ 編輯: scy2468 (111.83.146.241), 04/26/2016 11:13:34
→ tony15899: 層析梯度最後有設平衡時間嗎?
→ scy2468: 有耶 最後甲醇平衡10分鐘
※ 編輯: scy2468 (111.83.207.78), 04/26/2016 14:33:57
→ tony15899: 我是說平衡回你方法初始流洗夜比例的時間
→ scy2468: 啊好像沒有欸，可是我會先打四隻BK讓他跑完再跑樣品
→ scy2468: 之前結果也很正常，會不會卡冷壞了