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各位化學前輩們好 小弟我是師大化學分析組的碩班學生 目前實驗室是液相層析搭配質譜儀的領域 小弟我負責的儀器是Agilent 1100 nano pump 由於是做蛋白質體學領域的研究 因此使用的HPLC與管柱都是nano等級的 比較特別的是我們實驗室的毛細管管柱都是自己packing的 C18管柱 3um 小弟目前遇到的問題是這樣的 這問題糾結了半年之餘 實在摸不著頭緒才來這邊請教: 學理上而言 HPLC流動相為水相(H2O)時 壓力會較高 流動相為有機相時(ACN) 壓力會相對較低 因此當沖提方式為梯度沖提時 壓力的走向基本上要與梯度走向相反才是 但是小弟接上自己packing的管柱測試 使用的流速為0.3uL/min 系統的壓力隨著有機相梯度的拉升也跟著拉升 100%水相大約120bar 100%有機相來到約180bar 為了確認不是儀器本身的問題 小弟有借來一支市售管柱做測試 0.5mmx150mm 流速開到20uL/min 梯度壓力非常正常 水相70bar 有機相20bar 鬼打牆的是為何自己的管柱就行不通 材質粒徑都一樣只是內徑不同 更神奇的是這是實驗室的技術 歷屆學長姐都是用這個方法做實驗 怎麼到我這就問題連連 想請教各位化學人幫忙集思廣益找出小弟實驗的盲點 謝謝指教! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 175.96.65.96 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Chemistry/M.1492696099.A.9B3.html
htp: 有裝GuardColumn嗎?你的待測物是不是比較溶於水相,如果都 04/21 07:31
htp: 是就是… 他部分未溶在管柱前端… 04/21 07:31