小弟大三專題生一枚
最近在進行用靛酚比色法進行氨氮的定量
步驟大概是這樣
配置不同濃度的NH4Cl拉檢量線
試劑分別有
酚+乙醇的顯色劑
亞硝醯鐵氫化鈉溶液的催化劑
次氯酸鈉+氫氧化鈉+檸檬酸三鈉鹽的氧化劑
主要是酚經過反應會產生靛酚產生藍色
吸收波長約為640nm
今天遇到了一個問題，在試劑分別加入後
應該變成藍色的NH4Cl溶液，變成了藍綠色
而低濃度的(約0.1ppm)和只有水的blank
卻變成了黃色
使用plate reader發現，主要吸收波長為680nm和390nm
已經做了6次都是這樣，後來發現有橘紅色沉澱，查詢資料後發現，沉澱物可能為氫氧化
鐵
但是將試劑照光後，過兩天氫氧化鐵會沉澱，黃色的溶液也會變成無色，吸收波長也變成
了640nm
而其他有用鋁箔紙保住的溶液卻沒有這樣的變化
我有打電話去環檢所詢問，他們並沒有這樣的情形發生
請問各位，我該怎麼避免氫氧化鐵的副反應發生
理論上，他應該直接變成藍色，不應該有黃色的溶液產生
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