推 kdjf: 你的化合物是什麼類型? 而且ADH和IA用的是類似的固定相，你 05/27 07:45
→ kdjf: 用一樣的溶劑系統自然會看到類似的結果啊 05/27 07:45
m
我用IA ADH IB IG 都試過換系統也試了，換系統訊號出不來，不知道為何= =
[1;31m→ tony15899: 我看不懂你要問什麼 是分離很差還是進樣後沒有peak 05/27 09:56
→ tony15899: 而且你可以用梯度流洗 除非偵測器是RI 05/27 09:57
→ tony15899: 而且最後一張圖不算醜了 只是流洗強度有點太強 05/27 10:03
→ tony15899: 還有時間超過1小時的條件你可以不用試了 05/27 10:04
→ tony15899: 沒特殊需求拉長分析時間只會拖累你實驗時間 05/27 10:06
我就是因為時間拉太長我才換column但怎麼換都沒有理想的結果，我用的HPLC設定方法只能設一種，不過梯度好像也是可行的方法我會再想辦法試試看~感謝tony大建議，我換column就是因為訊號出不來，其他目前的大問題是訊號分不開，最後一張圖訊號只有5mV，所以是超級小的~
※ 編輯: hhuurraayy (220.136.213.181 臺灣), 05/27/2022 15:09:12
※ 編輯: hhuurraayy (220.136.213.181 臺灣), 05/27/2022 15:21:11
→ tony15899: 如果沒訊號 把管柱拆掉換連接管去跑看有沒有訊號出來 05/27 19:40
→ tony15899: 假設進樣正常的話偵測器訊號瞬間會出現一根 05/27 19:41
→ tony15899: 如果還是沒有訊號 1.你樣品瓶鎖太緊取樣時變真空吸不到 05/27 19:42
→ tony15899: 2. 檢查自動進樣或手動進樣設備，或是檢查樣品配製濃度 05/27 19:44
→ hhuurraayy: 就只有換IB有這個狀況其他都沒有~謝謝tony 大 05/27 22:36
→ hhuurraayy: 我明天會用梯度看看 05/27 22:36
推 encoreg10917: 有AD column 嗎 05/28 07:46
沒有哈哈
推 blue010679: 設梯度看看 05/28 17:21
推 blue010679: 表示你這兩個東西在這個極性下貼很近 然後我記得想要p 05/28 17:27
→ blue010679: eak比較不拖應該是要升流速 降流速峰寬變大更容易黏在 05/28 17:27
→ blue010679: 一起 然後看起來他在EtOH系統狀況不好 05/28 17:27
→ blue010679: 還是維持原系統然後溶劑比例從固定改成配兩瓶用混合拉 05/28 17:27
→ blue010679: 梯度方式試看看 再去抓梯度條件 05/28 17:27
感謝建議，我昨天想說用IA 0.1硬沖，有分開了，但時間要兩百分鐘，流速一大概三十分鐘就出來了，我得想法是先75/25十分鐘，再換成70/30流速0.3，不知blue大覺得如何，我沒試過梯度，所以也沒什麼方向，想說先試試
※ 編輯: hhuurraayy (140.122.57.38 臺灣), 05/29/2022 17:42:35
→ tony15899: 如果管柱是 250 * 4.6 mm 5μm, 基本的流速就是1mL/min 05/29 23:20
→ tony15899: 這個流速1一般是不會優先去變動的 都是動溶劑比例 05/29 23:24
→ tony15899: 除非你用的溶劑會導致系統壓力過高 例如純IPA 05/29 23:27
→ tony15899: 等梯度能在短時間出來大概就不用改梯度跑了 省去再平衡 05/29 23:28
→ tony15899: 只是要注意每次打完樣品要記得用適當強度溶劑洗管柱 05/29 23:30
好的，我會再試試~~感謝建議!!!!
推 blue010679: 先看管柱的說明書建議流速 上面應該會有管柱尺寸的建 05/31 11:28
→ blue010679: 議流速還有他的QC用的溶劑比例之類的 05/31 11:28
→ blue010679: 然後RT時間 因為是正向所以比例可以拉高極性看看 能不 05/31 11:28
→ blue010679: 能得到更好的peak集中性跟分離率 但還是要看整體壓力 05/31 11:28
→ blue010679: 不過要確定你的樣品提高極性不會析出 如果會可能會塞 05/31 11:28
→ blue010679: 管柱 05/31 11:28
→ blue010679: 有原條件的圖嗎 這樣才能比較原管柱跟改IAIA管柱的差 05/31 11:31
→ blue010679: 異 不過如果你兩隻管柱的參數差不多 那他的分離效果差 05/31 11:31
→ blue010679: 異不會太多 05/31 11:31
推 blue010679: 你最後ipa 換成EtOH 等於整體極性上升 雖然訊號很小但 05/31 11:39
→ blue010679: 看圖確實分離率跟RT時間有改善 如果管柱耐受可以 換回 05/31 11:39
→ blue010679: ADH 跟原本的移動相 然後把極性比例調高看看 不知道50 05/31 11:39
→ blue010679: /50有沒有辦法就是了 05/31 11:39
管柱耐受度不高，所以我把流速調慢，後來再試一次EtOH對我的化合物太強了，流速0.1來是雜，但我會再試試其他方法~~謝謝B大!!!!
※ 編輯: hhuurraayy (220.136.187.131 臺灣), 05/31/2022 15:21:58